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木薯MeLOB36基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体构建及验证

文献类型: 中文期刊

作者: 阳慧 1 ; 张彤 2 ; 王亚杰 2 ; 陆小花 2 ; 刘姣 2 ; 李瑞梅 2 ; 郭建春 2 ; 耿梦婷 1 ; 姚远 2 ;

作者机构: 1.海南大学热带作物学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词: 木薯;转录因子;MeLOB36基因;基因编辑

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2023 年 011 期

页码: 3612-3618

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: LBD基因家族是指含有侧生器官边界(lateral organ boundaries, LOB)结构域的一种植物特异性转录因子家族,在植物的生长发育和代谢调控等方面起着至关重要的作用。木薯MeLOB36基因是LBD基因家族成员,前期研究发现该基因在木薯根尖、体细胞胚、脆性胚性愈伤组织表达量较高,推测其参与了木薯植株的形态建成。为了鉴定MeLOB36基因的功能,本研究利用在线软件CRISPR-P v2.0在保守区域设计靶标MeLOB36基因的sg RNA,构建MeLOB36基因的编辑载体pCAMBIA1301-Cas9-MeLOB36-sg RNA。将重组载体转化LBA4404根癌农杆菌后侵染木薯脆性胚性愈伤组织,通过PCR扩增MeLOB36基因编辑靶点及潜在脱靶位点区段序列,进行Sanger测序。结果表明,MeLOB36基因被成功编辑,且未脱靶。本研究有助于进一步获得MeLOB36基因的突变体,从而鉴定MeLOB36转录因子对木薯植株形态建成的影响。

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