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重组早孕因子的原核表达及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 王聪 1 ; 王菡 1 ; 张海玲 2 ; 肖毅然 1 ; 郭禹汐 1 ; 刘梦迪 1 ; 李浩菘 1 ; 吴宗澄 1 ; 段芙春 1 ; 卢士英 1 ;

作者机构： 1.吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究教育部重点实验室

2.中国农业科学院特产研究所

关键词： 早孕因子;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 湖北农业科学

ISSN： 0439-8114

年卷期： 2023 年 62 卷 005 期

页码： 129-134

收录情况： 北大核心

摘要： 对牛源早孕因子进行生物信息学分析,构建了含有促溶标签的原核表达载体pET-28a-srEPF,经IPTG成功诱导表达,亲和层析纯化早孕因子,再以重组蛋白为免疫原,免疫动物制备多克隆抗体,Western blotting对表达蛋白及其多抗进行检测.结果表明,成功制备早孕因子重组蛋白,分子质量为26 ku,纯化后BCA法测定其浓度为1.1 mg/mL,早孕因子重组蛋白和去除抑制区的EPF蛋白均可与制备的多抗特异性结合,间接ELISA测定其效价为1:256000.

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