文献类型： 中文期刊
作者： 姜良 1 ; 黄秀芬 2 ; 王天坤 3 ; 刘杉杉 4 ; 李永清 2 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室吉林农业大学生物学院昌平区动物疫病预防控制中心
2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所
3.北京市昌平区动物疫病预防控制中心
4.中国农业科学院
关键词： 牛疱疹病毒1型;gE基因;胞外区;杆状病毒表达
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2014 年 09 期
页码： 915-920
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为获得具有生物学活性的牛疱疹病毒1型(BHV 1)囊膜糖蛋白gE,采用PCR方法从BHV 1感染的牛肾细胞全基因组中扩增出约1.7kb的gE基因,再将1 176bp的gE胞外区基因片段克隆到新型杆状病毒载体pFastBac-LIC-Bse中,构建重组转移质粒pFB-gE。将pFB-gE转化到杆状病毒基因组的DH10Bac感受态细胞中,制备重组杆粒rBacmid-gE。将该重组杆粒的DNA转染昆虫细胞Sf9,获得与gE基因发生重组的杆状病毒。Western-blot分析及间接免疫荧光试验(IFA)的结果显示,重组杆状病毒在Sf9中表达了分子质量大小约为43ku的gE融合蛋白,该融合蛋白分别与小鼠抗His标签单克隆抗体和小鼠抗BHV 1多克隆抗体发生特异性结合,表明获得的gE融合蛋白具有良好的免疫反应性。本研究为进一步获得高特异性的诊断抗原奠定了基础。
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