文献类型： 中文期刊

作者： 高雪 ¹ ; 张辛铭 ¹ ; 肖星星 ¹ ; 杨顺利 ¹ ; 尚佑军 ¹ ; 尹双辉 ¹ ; 蔡建平 ¹ ;

作者机构： 1.家畜疫病病原生物学国家重点实验室

关键词： 猪圆环病毒2型;衣壳蛋白;抗原表位;免疫原性

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2020 年 003 期

页码： 1-7

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪圆环病毒2型(PCV-2)衣壳蛋白(Cap)是研制基因工程疫苗和血清抗体检测方法的主要候选抗原.为筛选免疫原性强的Cap抗原表位,将定位在Cap上的6个B细胞线性表位的编码基因序列重新组合,命名为R1234、R1235、R1236、R2345、R2346和R3456,然后克隆至pET32a原核表达载体,转化到大肠埃希菌中进行诱导表达.通过对表达和纯化条件的优化,最终获得6个多抗原表位串联体的重组蛋白.Western blot和间接ELISA结果显示,6组重组表位蛋白均能被PCV-2阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性.将其与完整Cap分别免疫Balb/c小鼠,检测免疫后血清中特异性抗体和细胞因子水平以及脾脏淋巴细胞中CD4~+和CD8~+T淋巴细胞的比例.结果表明,R2346组合刺激机体产生的特异性抗体和细胞因子IFN-γ、IL-4的水平明显高于其他组,脾脏淋巴细胞中CD4~+和CD8~+T淋巴细胞含量与对照组相比显著增加(P<0.05),说明该重组蛋白能够刺激体液免疫和细胞免疫反应.因此,筛选获得的R2346重组表位蛋白可以作为研制PCV-2多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选抗原,用于PCV-2的预防和控制工作中.