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绵羊肺炎支原体荚膜多糖的提取纯化及反应原性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 田彤彤 1 ; 葛家振 2 ; 李倩倩 3 ; 高鹏程 2 ; 吴晓妮 2 ; 宋国栋 2 ; 刘一健 2 ; 郑福英 2 ; 储岳峰 1 ;

作者机构: 1.新疆农业大学动物医学学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

3.西北民族大学生命科学与工程学院

关键词: 绵羊肺炎支原体;荚膜多糖;三螺旋结构;反应原性

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN:

年卷期: 2024 年 001 期

页码: 41-47

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究旨在提取绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)GH3-3的荚膜多糖,并验证其反应原性。用无水乙醇沉淀得到粗荚膜多糖,再通过苯酚抽提、酶处理去除核酸和蛋白质,进而纯化得到荚膜多糖,利用免疫荧光试验证明该荚膜多糖的反应原性,利用刚果红试验检测其是否具有三螺旋结构。从1 L培养基上清中初步提取得到Mo GH3-3粗荚膜多糖12.24 mg,经过纯化得到9.8 mg的精制荚膜多糖,其纯化得率约为80%。免疫荧光试验结果表明Mo GH3-3荚膜多糖具有良好的反应原性,刚果红试验首次证明绵羊肺炎支原体荚膜多糖具有三螺旋结构。经过乙醇沉淀、苯酚抽提、酶处理、超滤浓缩后,得到高纯度的Mo GH3-3荚膜多糖。该提取纯化方法简便、成本低,便于生产实践中应用。荚膜多糖具有反应原性和三螺旋结构,证明其生物活性良好,为相关诊断试剂、疫苗、佐剂等的研发提供了可参考的多糖制备方法。

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