文献类型： 中文期刊
作者：
沈旦枫
1
;
王睿
1
;
郭佃磊
1
;
霍琳琳
1
;
刘永刚
1
;
郭龙军
1
;
王玉娥
1
;
李曦
1
;
作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室
关键词： 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒;原核表达;猪源化重组抗体
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2017 年 39 卷 03 期
页码： 220-224
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为制备与猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)具有反应活性的猪源化原核表达抗体(Pr Ab),本实验通过流式细胞技术,以PRRSV GP5蛋白多肽及抗猪Ig G抗体,筛选出能够与PRRSV抗原表位结合的阳性B淋巴细胞,利用RT-PCR从筛选得到的B细胞的mRNA中扩增出编码抗体重链可变区(VH)基因序列和轻链可变区(VL)基因序列,将扩增的可变区基因序列分别与本实验室前期克隆的猪源抗体轻链恒定区(CL)和重链恒定区(CH)基因序列连接后,以Linker序列将轻链和重链全长基因序列相连,构建全长的猪源抗体编码基因(H-linker-L)。将该基因克隆于原核表达载体p ET-28a中进行原核表达及纯化。Western blot鉴定结果显示,表达的重组蛋白能够被抗猪IgG抗体所识别,表明表达的重组蛋白为PrAb;经PRRSV包被的ELISA鉴定,PrAb与PRRSV弱毒株CH1R和强毒株HuN4呈阳性反应,表明所制备的PrAb为PRRSV特异性抗体。本实验为进一步制备诊断PRRS的猪源化重组抗体奠定了基础。
- 相关文献
[1]猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒结构蛋白的反向遗传研究. 袁世山,孙志,韦祖樟,谭菲菲,田德斌,李燕华. 2010
[2]猪FcγRⅢ双抗体夹心ELISA方法的建立及其在PRRSV感染猪中的初步应用. 谷伟红,郭龙军,牛军伟,田志军,冯力,王玉娥. 2016
[3]猪caspase-1p20多克隆抗体制备及其在猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染中的初步应用. 刘园园,李江南,刘琴芳,张枫,张利杰,黄丽,穆杨,翁长江. 2014
[4]PRRSV强弱病毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定. 吕健,韦祖樟,高飞,郑海红,童光志,袁世山. 2013
[5]猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA刺激下NLRP3与DDX19A共定位的研究. 王胜男,刘园园,胡亮,李江南,翁长江. 2016
[6]猪FcγRIII双抗体夹心ELISA方法的建立及其在PRRSV感染猪中的初步应用. 谷伟红,王玉娥. 2015
[7]非结构蛋白2高变区在PRRSV复制中的作用. 吕健,韦祖樟,高飞,郑海红,童光志. 2012
[8]猪caspase-1 p20多克隆抗体制备及其在猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染中的初步应用. 刘园园,李江南,刘琴芳,张枫,张利杰,黄丽,穆杨,翁长江. 2014
[9]天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株ORF5基因的克隆及遗传变异分析. 李文忠,荣新利,刘野,吴庆东,张乐,孙英峰,于海. 2025
[10]基于反向遗传平台的套式病毒蛋白结构与功能研究. 张荣. 2013
[11]ADAM17介导的CD163表达调控对PRRSV感染的影响. 牛军伟. 2015
[12]细胞miRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）复制的相关研究. 李丽薇. 2015
[13]猪繁殖与呼吸综合征病毒5'非翻译区的结构与功能解析. 陆嘉琦. 2011
[14]猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白在病毒复制过程中的作用研究. 谭菲菲. 2010
[15]猪繁殖与呼吸综合征病毒RdRp的功能解析. 周艳. 2012
[16]鸭疫里默氏杆菌血凝素基因的克隆、表达及其蛋白的定位分析. 屠晶,胡青海,于圣青,丁铲,韩先干,朱寅玉,王小兰,苗双,卢凤英. 2011
[17]抗东方马脑炎病毒结构蛋白E2的单克隆抗体的制备与鉴定. 赵晶,孙恩成,刘霓红,杨涛,耿宏伟. 2011
[18]大豆球蛋白A1a酸性多肽的原核表达及纯化. 刘宾,滕达,杨雅麟,王建华. 2011
[19]PEDV N蛋白的原核表达与ELISA方法的建立. 孔宁,潘溪,童武,李国新,郑浩,周恩民,单同领,童光志. 2014
[20]狂犬病病毒基质蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立. 宫苗苗,曾妮,李刚. 2012
作者其他论文 更多>>
-
巴马香猪不同生长阶段肠道微生物的变化
作者：卫孟瑶;李发亮;莫家远;刘永刚;李步高;黄雷;李奎
关键词：粪便;微生物;生长发育;巴马香猪
-
光伏电站建设的生态效应:光伏治沙研究进展与展望
作者：刘坤;王波;张发国;吴晓;王睿;张峰;贾蓉;张红星;未丽;董礼;包爱科
关键词：荒漠化;光伏;植被恢复;治沙
-
外源褪黑素对高粱苗期冷害的缓解作用研究
作者：周光怡;刘晓娟;王睿;安玉霞;覃显娇;任明见;王运帮
关键词：高粱;褪黑素;低温胁迫;生理机制;内源激素
-
酒用糯高粱萌发期抗旱性鉴定及评价
作者：王睿;李魁印;董俐利;张燕;周光怡;曾桂萍;陈松树;何方;徐如宏;任明见
关键词：糯高粱;萌发期;抗旱性;抗旱指标;综合评价
-
《动物研究:体内实验报告》即ARRIVE 2.0指南的解释和阐述(五)
作者：马政文;李夏莹;刘晓宇;李垚;王剑;卢今;陈国元;卢晓;白玉;卢选成;刘永刚;陶雨风;庞万勇
关键词：动物实验;ARRIVE 2.0指南;ARRIVE推荐11条;疼痛管理;动物照护和监测
-
PEG-6000模拟干旱胁迫对糯高粱幼苗生理特性的影响
作者：王睿;马前;李魁印;章洁琼;周光怡;任明见
关键词：糯高粱;苗期;干旱胁迫;生理特性;抗旱性评价
-
SPF鸡的主要垂直传播性病原体及其检测标准分析
作者：王梦杰;马文杰;潘喻;陈见兴;张贺;夏长友;王玉娥
关键词：SPF鸡;垂直传播;病原检测
