貂肠炎病毒微滴数字PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 商金源

作者： 商金源;叶京飞;罗国良;王振军;冯二凯;王春霞;贾北宁;李斌茹;赵宗正;陈明军;魏先力;程悦宁

作者机构：

关键词： 貂肠炎病毒;微滴数字PCR;定量检测

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 002 期

页码： 156-162

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立一种貂肠炎病毒（MEV）微滴数字PCR（ddPCR）方法，对貂肠炎病毒的定量诊断提供技术支持。在实时荧光定量PCR（qPCR）检测方法的基础上，建立了貂肠炎病毒微滴数字PCR方法，优化了该检测方法的反应条件，并评估了其敏感性、特异性、重复性。结果显示，建立的ddPCR方法最佳引物和探针终浓度分别为900和250 nmol/L，最佳退火温度为55℃，最佳升降温速度为2.5℃/s，本方法的最低检测下限为1.07×10~0copies/μL，未发现与常见疫病病毒存在交叉反应，重复性试验的变异系数小于5%。采用该微滴数字PCR和实时荧光PCR对40份水貂肠道、粪便样品进行检测，检测结果与临床检验结果相符。结果表明，本研究中建立的微滴数字PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好，适用于临床样品的貂肠炎病毒核酸检测，为貂肠炎病毒感染的早期检测提供了技术支持。

分类号： S858.92

  • 相关文献

[1]伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株微滴数字PCR鉴别方法的建立. 兰德松,魏澍,顾贵波,侯振中. 2018

[2]MEV、ADV和CAV三种病毒多重PCR检测方法的建立. 罗彬,易立,王建科,程世鹏. 2009

[3]马铃薯M病毒微滴数字PCR检测方法的建立. 刘晗,黄洁芳,向均,燕照玲,张永江. 2018

[4]转基因玉米T25数字PCR方法的建立与验证. 李夏莹,武玉花,李俊,肖晓琳,张飞燕,梁晋刚,王顥潜,张旭冬,张秀杰. 2020

[5]利用微滴数字PCR技术分析转基因大豆‘GE-J12’中外源基因的拷贝数. 赵新,刘双,刘娜,李瑞环,曹英芳,兰青阔,王永. 2022

[6]应用微滴数字PCR同时检测瓜类种子携带果斑病菌和角斑病菌. 赵子婧,芦钰,田文,王玉玺,温常龙,李健强,徐秀兰,罗来鑫. 2021

[7]实时荧光定量PCR技术在食品微生物检测和研究中的应用. 李勤,盛占武,孙志高. 2006

[8]快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用. 万超,温国元,潘兹书,张楚瑜,熊中良,杨峻,艾地云. 2006

[9]Taqman探针实时定量PCR检测猪伪狂犬病毒. 张雪寒,何孔旺,缪文凯,茅爱华,俞正玉. 2008

[10]竞争性PCR定量检测鸡传染性贫血病毒核酸. 刘泽文,徐涤平,周平华,杨峻,段正赢,汪宏才,邵华斌,山口成夫. 2005

[11]土壤中寄生性杂草弯管列当种子检测体系的建立及应用. 王亚娇,栗秋生,郑贵银,纪莉景,吴玉星,孔令晓. 2019

[12]快速检测牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR技术建立及应用. 郭锐,陈平,田永祥,杨克礼,刘泽文,段正赢,梁望旺. 2011

[13]TaqMan探针实时荧光定量PCR检测番茄黄化曲叶病毒. 阮美颖,叶青静,王荣青,周国治,姚祝平,李志邈,万红建,杨悦俭. 2012

[14]胶体金免疫层析法快速定量分析粮油农产品中黄曲霉毒素B_1. 王督,张文,李培武,张奇,张兆威. 2014

[15]MPN-PCR法定量检测武汉鸡肉制品中的空肠弯曲菌. 韩梅,董俊,邵华斌,罗玲,罗青平,潘玲,张腾飞. 2015

[16]实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转基因成分的数据分析及其标准化研究. 张丽,曹应龙,王海英,梁晓声,卢长明. 2014

[17]胶体金免疫层析试纸条快速定量检测Asia1型口蹄疫病毒含量方法的建立. 朱玉婵,林密,孙燕燕,孙继国,蒋韬. 2014

[18]Real-time PCR技术用于大菱鲆红体病虹彩病毒的组织敏感性检测及病毒流行情况调查. 吴成龙,史成银,黄倢,孔晓瑜. 2008

[19]鸭坦布苏病毒竞争定量PCR检测方法的建立与应用. 袁朋,王斌,许传田,杨少华,黄庆华,张秀美,张琳. 2015

[20]乳铁蛋白检测及应用研究进展. 郝丽媛,孙鹏,卜登攀,王建,南雪梅,杜洪. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序