绵羊骨骼肌卫星细胞分离培养、鉴定与成肌诱导分化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李欣

作者： 李欣;于永生;张立春;马惠海;罗晓彤;魏天;肖成;张琪;曹阳;赵中利

作者机构：

关键词： 绵羊;骨骼肌卫星细胞;分离培养;免疫荧光鉴定;成肌诱导分化

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2021 年 004 期

页码： 1204-1210

收录情况： 北大核心

摘要： 试验旨在分离绵羊骨骼肌卫星细胞（skeletal20muscle20satellite20cells,20SMSCs）,建立绵羊SMSCs体外分离、培养及鉴定体系,为后续研究提供种子细胞。以新生健康绵羊为试验动物,采用胶原酶Ⅳ和胰酶两步酶消化法和差速贴壁法分离并纯化SMSCs。用RT-PCR和免疫荧光法鉴定SMSCs标记基因配对盒基因7（paired20box207,Pax7）、结蛋白（Desmin）和生肌调节因子1（myogenic20regulatory20factors201,MyoD1）的表达情况;用血清撤离法诱导SMSCs向成肌细胞方向分化,成肌诱导后观察肌管的形成,免疫荧光法检测成肌分化特异性标志肌球蛋白重链（myosin20heavy20chain,20MHC）的表达。RT-PCR结果显示,扩增条带与预期相符,所分离细胞表达SMSCs标记基因Pax7、Desmin和MyoD1;免疫荧光鉴定结果显示,所分离细胞表达SMSCs标记蛋白Pax7、Desmin和MyoD1;成肌诱导后镜下可见细胞相互融合形成多核的肌管,并表达成肌特异性标志MHC。本试验分离了绵羊SMSCs,建立了适用于绵羊SMSCs的体外培养体系,并成功进行了成肌诱导分化,为今后研究绵羊骨骼肌生长发育机制提供了试验材料和技术支撑。

分类号： S826

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