奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹丽萍

作者： 曹丽萍;丁炜东

作者机构：

关键词： 奥利亚罗非鱼;促性腺激素释放激素;相关肽;基因克隆;原核表达

期刊名称： 上海水产大学学报

ISSN： 1004-7271

年卷期： 2006 年 15 卷 03 期

页码： 3270-3275

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。本研究通过RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400 bp的目的序列GnRH,并将其克隆到T载体中,经酶切鉴定、序列测定分析后表明其与尼罗罗非鱼和乌颊海鲷具有较高的同源性,处于同一个进化分支上;而与日本青、金鱼、拟鲤、壁虎等的同源性较低。将此cDNA片段定向克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,转化到大肠杆菌TB1中,0.3M IPTG诱导4 h后成功表达出与预期大小相符的约56 kD的融合蛋白。表明大肠杆菌表达系统可以成功地体外表达奥利亚罗非鱼GnRH,为进一步制备抗体了解其免疫调节作用奠定基础。

分类号： S917.4

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