猪戊型肝炎病毒基因ORF2片段AG02的融合表达及间接ELISA方法的初步建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张可心

作者： 张可心;赵敏;郭巍;于敏;赵宇军;相文华

作者机构：

关键词： 戊型肝炎病毒;ORF2片段;原核表达;间接ELISA

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2006 年 26 卷 08 期

页码： 37-41

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用巢式RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(SHEV)结构蛋白基因ORF2部分片段AG02。将该片段插入pET32a表达载体,命名为PET-HEV,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE-3),经1mmol/LIPTG诱导得到表达,进行SDS-PAGE分析,证明该片段得到融合表达,分子量为33kDa。Westernblot分析表明,重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性。以纯化的重组蛋白建立了初步的间接ELISA方法,经方阵滴定确定最佳包被浓度为2.43μg/ml,血清最佳的稀释比为1∶40。建立的ELISA方法有较高的特异性和敏感性。

分类号： S854.43`Q789

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