玉米根腐病菌麦根腐平脐蠕孢的LAMP检测方法
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘树森
作者: 刘树森;郭宁;孙华;马红霞;张海剑;石洁
作者机构:
关键词: 玉米根腐病;麦根腐平脐蠕孢;Brn1基因;环介导等温扩增;检测方法
期刊名称: 华北农学报
ISSN: 1000-7091
年卷期: 2023 年 001 期
页码: 162-167
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 麦根腐平脐蠕孢是玉米根腐病的重要病原菌之一,旨为建立一种基于环介导等温扩增技术(LAMP)的麦根腐平脐蠕孢快速检测方法。首先,根据麦根腐平脐蠕孢参与黑色素生物合成途径的Brn1基因部分序列设计了一套LAMP检测引物;然后,针对该引物组筛选了其最佳反应温度,检测了LAMP反应的特异性和灵敏度,并以人工接种麦根腐平脐蠕孢的玉米根腐病病株为样本评价了LAMP检测方法的效果。结果表明,本研究设计的引物组在61~68℃条件下均能实现对靶标基因的扩增,其中以66℃为最佳反应温度;在特异性检测中,引物组能从10种分离自玉米根腐病样本的主要病原真菌DNA中特异性地检测出麦根腐平脐蠕孢;在灵敏度检测中,对携带靶基因Brn1的质粒DNA最低检测限是10 copies/μL,在此检测限浓度下,25 min左右即可实现扩增;在对玉米根腐病样本检测中,在1 pg/μL的玉米根组织DNA中即可检测出麦根腐平脐蠕孢。建立的麦根腐平脐蠕孢LAMP检测方法具有较强的特异性和较高的灵敏度。
分类号: S435.131
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