猪萨佩罗病毒VP1蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李娜娜

作者： 李娜娜;陶洁;李本强;石迎;程靖华;乔长涛;刘惠莉

作者机构：

关键词： 猪萨佩罗病毒;VP1蛋白;原核表达;间接ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 004 期

页码： 435-440

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立猪萨佩罗病毒（PSV）的快速检测方法,本试验以重组VP1蛋白为包被抗原建立了检测PSV Ig G的间接ELISA方法。RT-PCR从PSV分离株SHCM2019中扩增VP1基因,将其克隆到原核表达载体p ET28a,对重组质粒pET28a-VP1进行原核表达,经Western-blotting检测后,利用VP1重组蛋白建立检测猪血清中PSV Ig G抗体的间接ELISA方法。结果显示,表达的VP1蛋白分子质量约为40 ku,与预期大小相符,Western-blotting表明,重组蛋白与PSV抗体阳性血清具有良好反应原性。以VP1蛋白为抗原建立的ELISA方法与猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）及牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的阳性血清均无交叉反应,特异性好;批内和批间的变异系数均小于10%,重复性好。利用建立的间接ELISA方法对95份猪临床血清样本进行检测,阳性率为44.21%。本研究建立的检测方法为PSV的血清学诊断提供了可靠手段。

分类号： S852.651

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