绵羊肺炎支原体特异性诊断靶标筛选及其间接ELISA方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李倩倩
作者: 李倩倩;高鹏程;葛家振;吴晓妮;田彤彤;许健;郝华芳;郑福英;蔺国珍;储岳峰
作者机构:
关键词: 绵羊肺炎支原体;Mo pdhD;免疫原性;间接ELISA
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2023 年 004 期
页码: 439-447
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究旨在筛选出绵羊肺炎支原体(Mo)特异性抗原靶标,并建立间接ELISA方法。利用Pulldown实验结合LC-MS技术分析,筛选Mo的抗原靶标并进行表达纯化,使用Western-blot试验分析纯化蛋白的反应原性;免疫小鼠,分析蛋白免疫原性、制备免疫血清,建立基于靶标蛋白的间接ELISA方法,并对其进行性能评价。结果显示,筛选出的Mo pdhD蛋白的分子质量为71 ku,该蛋白与稀释度为1∶4 000的Mo阳性血清仍可以发生反应,免疫小鼠血清效价可达1∶102 400,建立的间接ELISA方法不与绵羊痘病例等的阳性血清产生交叉反应,批间及批内重复的变异系数均在12%以内,与IHA法符合率可达82.5%。可见,Mo pdhD蛋白具有良好的反应原性与免疫原性,建立的间接ELISA方法性能良好,可用于Mo的血清学诊断,为进一步研发Mo ELISA抗体检测试剂盒奠定了基础。
分类号: S858.26
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