猪δ冠状病毒M蛋白的原核表达、纯化与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 魏姗

作者： 魏姗;石达;陈建飞;冯力;孙东波

作者机构：

关键词： 猪δ冠状病毒;M蛋白;基因表达;蛋白纯化;免疫印迹

期刊名称： 黑龙江八一农垦大学学报

ISSN： 1002-2090

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 41-45

摘要： δ冠状病毒是一种可以感染哺乳动物和鸟类的新型冠状病毒,其中,猪δ冠状病毒可以引发仔猪的呕吐、腹泻、脱水,甚至死亡,给养猪业造成了巨大的损失。为了获得猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)M基因重组蛋白,试验克隆了PDCoV NH毒株的M基因,并连接至pET-32a原核表达载体,构建了PDCoV M基因重组质粒(pET-32a-M),将pET-32aM重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,利用1 mM浓度IPTG进行诱导表达,进一步对表达的PDCoV重组M蛋白进行纯化与鉴定。结果显示,以PDCoV NH毒株病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出约654 bp的M基因,与预期大小相符;SDSPAGE电泳结果显示,PDCoV M基因在大肠杆菌BL21(DE3)中成功获得表达,表达的重组M蛋白大小为42 kD,与预期大小相符;通过western blot进行鉴定,结果显示,纯化的重组M蛋白能与PDCoV阳性血清发生反应,具有良好的抗原性。研究成功表达了PDCoV M蛋白,为PDCoV的进一步研究奠定了基础。

分类号： S852.651

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