中国兰SRAP-PCR体系的建立及优化
文献类型: 中文期刊
第一作者: 叶兰香
作者: 蒋彧;李萍;王海娥;何俊蓉;刘菲;卓碧萍;袁宁
作者机构:
关键词: 国兰;SRAP-PCR;正交设计;反应体系
期刊名称: 西南农业学报
ISSN: 1001-4829
年卷期: 2010 年 23 卷 05 期
页码: 1648-1651
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 序列相关扩增多态性(SRAP)是新一代的分子标记技术,尚未在兰花中应用过。本实验运用改进了的CTAB法提取国兰总DNA,并L16(45)正交设计,对影响中国兰PCR反应的4个因素(引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、扩增模版)在4个水平上进行优化试验,结果采用DPS软件分析。结果表明,在25μl总体积中,Taq酶为1个单位的情况下,中国兰SRAP-PCR反应最佳扩增体系为:Mg2+2 mmol.L-1、DNA模版100μg、dNTPs 0.25 mmol.L-1、引物0.3μmol.L-1。这一优化的SRAP-PCR体系的建立为后续国兰SRAP分析奠定基础。
分类号: S682.31
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