斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒的巢式PCR检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蒲小明

作者： 蒲小明;邓海滨;路征;张景欣;孙大元;沈会芳;刘平平;林壁润;杨祁云

作者机构：

关键词： 斜纹夜蛾核型多角体病毒;成虫;egt;巢式PCR;检测

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2023 年 39 卷 009 期

页码： 128-133

收录情况： CSCD

摘要： 旨在建立一种快速、可靠的斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒(Spodoptera litura Nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)的分子检测方法,以克服目前常规PCR技术很难检测到斜纹夜蛾成虫带病毒的缺陷.以SpltNPV的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖转移酶(ecdysteroid UDP-glucosyltransferase,egt)基因为检测对象,基于该基因序列设计了巢式PCR引物,其中一对外侧引物egt-F/R和一对内侧引物egt1-F/R,并研究斜纹夜蛾成虫带毒的巢式PCR检测可靠性.结果表明:基于egt基因的巢式PCR方法可以特异性扩增SpltNPV的DNA,引物egt-F/R的扩增检测最低限为1 0-7 μg/μL;且基于引物egt-F/R的两轮普通PCR无法检测出成虫带毒,而采用巢式PCR方法可有效扩增出目的egt片段,巢式PCR检测方法的灵敏度比两轮普通PCR检测方法提高2个数量级.因此,本研究成功建立了基于SpltNPV的egt基因的巢式PCR检测技术,该方法为斜纹夜蛾成虫带毒、传毒等流行病学研究提供了可靠的技术支撑.

分类号： S433.4

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