水稻纹枯病菌6-磷酸葡萄糖胺合成酶基因的克隆、测序及表达分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 罗楚平
作者: 罗楚平;刘永锋;陈志谊;王晓宇;方先文;陈忠明;刘邮洲;聂亚锋;张荣胜
作者机构:
关键词: 水稻纹枯病菌;6-磷酸葡萄糖胺合成酶;活性物质;克隆表达
期刊名称: 中国水稻科学
ISSN: 1001-7216
年卷期: 2012 年 26 卷 02 期
页码: 137-143
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为筛选新型水稻纹枯病菌GlmS活性抑制物质,采用3'RACE和5'RACE克隆了水稻纹枯病菌GlmS的基因组DNA序列和完整的cDNA序列。GlmS基因组DNA序列全长2 529 bp,含有8个内含子;GlmS cDNA序列全长2094 bp,推测编码一个含有697个氨基酸残基,分子量约为76.7 kD的蛋白质。生物信息学分析表明水稻纹枯病菌GlmS含有1个谷氨酰胺氨基转移酶结构域和2个葡萄糖异构酶结构域。采用大肠杆菌重组融合表达GlmS,重组蛋白的分子量经过葡聚糖凝胶层析和SDS-PAGE电泳测得分别为306 kD和77 kD,表明GlmS是由4个相同大小亚基组成的多聚酶复合体。重组蛋白的酶学性质研究表明其最适反应温度为37℃,最适pH为6.4,42℃下的半衰期为1 h,在pH 5.5~7.5时比较稳定。GlmS催化反应能被己糖胺通路末端产物鸟苷氮乙酰葡萄糖胺反馈抑制。
分类号: S435.111.41
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