甘薯褪绿矮化病毒外壳蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦艳红

作者： 秦艳红;乔奇;张德胜;田雨婷;王爽;王永江;张振臣

作者机构：

关键词： 甘薯褪绿矮化病毒;基因克隆;序列分析;外壳蛋白;原核表达

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2013 年 42 卷 06 期

页码： 85-87，120

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 克隆甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)外壳蛋白(CP)基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行诱导表达。根据已报道的甘薯褪绿矮化病毒西非(WA)株系基因组核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR方法克隆了SPCSV四川分离物基因组RNA2上1 902bp大小的片段。序列分析表明,该片段包括部分p60基因序列、完整的p8基因和CP基因(major CP)序列及部分mCP基因(minor CP)序列。CP基因由774个核苷酸组成,编码257个氨基酸残基,与已发表的SPCSV WA株系Can181-9分离物相比,其核苷酸和氨基酸序列一致性分别为99.48%和99.22%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的融合蛋白分子量约为38kD,为SPCSV抗血清的制备及其血清学检测技术的建立奠定了基础。

分类号： S435.31

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