基于液质联用技术定量分析牛体外受精胚胎中谷胱甘肽含量

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李凤

作者： 李凤;崔立欣;郝海生;刘岩;赵学明;庞云渭;朱化彬;杜卫华

作者机构：

关键词： 牛;胚胎发育;谷胱甘肽;氧自由基;液质联用

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2018 年 12 期

页码： 2622-2631

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在为探索外源谷胱甘肽(glutathione,GSH)影响胚胎发育的机制提供研究方法。将牛体外受精胚胎分别置于含GSH(3 mmol·L~(-1),处理组)和不含GSH(对照组)的培养液中培养7 d,统计两组胚胎的卵裂率、桑椹胚率、囊胚率和囊胚总细胞数;并分别采用荧光染色法和液质联用技术(liquid chromatography mass spectrometry,LC/MS)对不同发育阶段的牛受精卵(受精后8、18、24、32 h)中GSH进行定量和跟踪分析,同时分析其中氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的含量。另外,在受精卵培养液中添加GSH的同位素标记物(GSX),利用LC/MS检测受精卵及其培养液中GSX含量。结果表明:1)外源GSH可显著或极显著降低受精后18、24、32 h胚胎内ROS的含量(P <0. 05,P <0. 01)。2)处理组胚胎的桑椹胚率(58. 67%vs. 48. 46%)、囊胚率(50. 83%vs. 34. 88%)和囊胚总细胞数(102. 26 vs. 76. 27)显著高于对照组(P <0. 05)。3)各发育阶段(受精后18、24、32 h)的处理组受精卵中,GSH的含量均显著高于对照组(P <0. 05),且随发育进程而逐渐下降。4)外源GSX也显著提高了处理组受精卵(受精后18、24、32 h)中GSH含量(P <0. 05),培养液中GSX的浓度则随培养时间的延长而持续下降。综上表明,外源GSH可清除胚胎内ROS,提高胚胎发育率和囊胚质量; LC/MS是定量分析胚胎内GSH及其同位素标记物的可靠方法,可用于外源GSH促进胚胎体外发育的机制研究。

分类号： S823

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