乙型肝炎病毒B、C、D基因型AAV-HBV小鼠模型构建与病毒学特征比较

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郑晓文

作者： 郑晓文;冯成千;李华鹏;刘土花;古国铭;康桦华;徐志宏;胡凤玉;李锋

作者机构：

关键词： 乙型肝炎病毒;AAV-HBV;B、C基因型

期刊名称： 热带医学杂志

ISSN： 1672-3619

年卷期： 2020 年 03 期

页码： 297-302+308

摘要： 目的建立乙型肝炎病毒(HBV)B、C基因型中国流行株腺相关病毒介导的乙肝病毒(AAV-HBV)小鼠模型,并研究其病毒学变化特征。方法以B、C基因型HBV流行株序列为基础,并参照常用D基因型病毒序列,分别构建出携带1.3×基因组的腺相关病毒载体质粒:p AAV-HBV1.3×(B)、pAAV-HBV1.3×(C)和pAAV-HBV1.3×(D)。通过三质粒共转染方法在293细胞中包装成三种成熟的腺相关病毒载体rAAV-HBV 1.3(B)、rAAV-HBV 1.3(C)与rAAV-HBV1.3(D)。C57BL/J小鼠通过尾静脉注射相同剂量的AAV-HBV病毒载体,在注射后不同时间点,用ELISA方法检测血清中HBsAg和HBeAg表达水平,用荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测小鼠血清中HBV DNA拷贝数。结果新构建B、C基因型两株病毒有更高HBsAg表达水平,B基因型小鼠血清中HBsAg检测值(均值)波动在957.67～2 590.04 IU/mL,C基因型小鼠血清HBsAg波动在725.21～3 195.16 IU/mL,D基因型小鼠血清HBsAg波动在153.4～531.8 IU/mL。B基因型小鼠血清中,HBsAg与HBV DNA比值最高,D基因型最低。新构建B、C基因型两株病毒表现出与常用D基因型病毒不同的血清动力学特征。B、C基因型小鼠的HBsAg和HBV DNA可在1周内快速达到较高水平,并维持稳定,在第3～4周表现出波动下降,随后表达水平回升。D基因型小鼠HBsAg在10 d内达到峰值,然后不断降低,HBV DNA在第3～4周也有明显波动。B、C、D三种基因型HBeAg在第1周较低,在两周达到峰值,并保持稳定。结论基于我国流行B、C基因型序列,成功建立了两株AAV-HBV小鼠模型,为研究B、C基因型病毒提供了新工具。

分类号： R512.62`R-332

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