犬细小病毒SH14株VP2基因原核表达及免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 唐井玉

作者： 唐井玉;李传峰;宫晓华;李琦;丁明洋;陈宗艳;王桂军;刘光清

作者机构：

关键词： 犬细小病毒;VP2基因;原核表达;免疫原性

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2016 年 24 卷 01 期

页码： 38-43

摘要： 根据犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)SH14株基因序列设计引物,采用PCR方法扩增CPV VP2基因,经Bam HⅠ、XhoⅠ双酶切后,将其克隆至p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-VP2,经酶切鉴定和测序验证正确后转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,应用SDS-PAGE法检测蛋白的表达。然后,使用纯化的重组VP2蛋白制备其兔源多克隆抗体,分别应用蛋白免疫印迹、间接免疫荧光检测该抗体的免疫原性。结果表明,p GEX-4T-VP2能在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达,所制备的兔抗CPV-VP2抗体能与重组蛋白和病毒蛋白发生特异性反应。本研究为研发CPV亚单位疫苗、检测技术及致病机理研究等奠定了物质基础。

分类号： S852.655

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