科研产出
白花除虫菊高效再生体系的建立
《福建农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选出适宜白花除虫菊外植体的消毒方法、外植体诱导、继代培养及生根培养阶段适宜的培养基配方,建立白花除虫菊高效再生体系.[方法]以白花除虫菊尚未张开的花蕾作为再生体系的外植体材料,花蕾经过灭菌消毒以后,采用MS固体培养基,比较不同种类植物生长调节剂浓度配比对白花除虫菊花蕾诱导出芽、增殖及生根等关键环节的影响.[结果]白花除虫菊花蕾外植体最适宜的消毒条件为75%酒精处理30 s后用0.10%氯化汞溶液消毒10 min,之后用15%次氯酸溶液处理15 min;白花除虫菊花蕾诱导芽的最适培养基为MS+2.0 mg·L?16-BA+0.5 mg·L?1TDZ+0.2 mg·L?1IBA;白花除虫菊芽增殖的最适培养基为MS+1.0 mg·L?16-BA+0.1 mg·L?1TDZ+0.1 mg·L?1IBA;白花除虫菊生根的最适培养基为MS+0.1 mg·L?1IAA+0.1 mg·L?1IBA;炼苗移栽的最适基质为泥炭:珍珠岩=6:1,成活率达90%以上,移栽效果良好.[结论]基本建立了白花除虫菊高效再生体系,可为繁育白花除虫菊种苗提供技术支撑.
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桑褐斑壳丰孢菌pmcamk基因的克隆与表达时相分析
《蚕业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：钙/钙调素依赖性蛋白激酶（calcium/calmodulin-dependent protein kinases, CAMK）作为钙信号途径中的关键蛋白，在多种细胞过程中发挥重要作用。以桑褐斑壳丰孢菌（Phloeospora maculans）为研究对象，利用反转录PCR结合RACE技术克隆桑褐斑壳丰孢菌（Phloeospora maculans）钙/钙调素依赖性蛋白激酶基因pmcamk的序列全长，利用荧光定量PCR技术，研究pmcamk在桑褐斑壳丰孢菌侵染宿主后不同时期以及其分生孢子在水中萌发过程中的表达模式，以期深入了解桑褐斑壳丰孢菌Ca2+信号转导途径与孢子萌发之间的关系。结果表明，pmcamk的cDNA序列全长为1 422 bp,由1 221 bp的开放阅读框和201 bp的3′非翻译区组成，GenBank登录号为MK713976。pmcamk开放阅读框共编码406个氨基酸残基，蛋白质分子质量约为45.5 kD,等电点为6.28。系统进化树分析表明桑褐斑壳丰孢菌与小麦叶枯病菌的CAMK同源性最高，属于CAMKⅠ类群并且聚类在同一进化分支。在桑褐斑壳丰孢菌侵染桑树的早期阶段（0.25、 0.5、1 d）,pmcamk的表达量呈上升趋势，在侵染后2、3、4、6 d其表达量逐渐下降。这与不同时间阶段桑褐斑壳丰孢菌在水中萌发过程中pmcamk的表达趋势基本一致，推测PmCAMK在桑褐斑病菌孢子萌发过程中发挥着重要作用。
关键词： 桑褐斑病 桑褐斑壳丰孢菌 钙/钙调素依赖性蛋白激酶 基因克隆 表达时相
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不同禾本科作物中ZmWRKY79同源基因的鉴定与分析
《西南农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】玉米ZmWRKY79基因在合成植保素和干旱胁迫响应中发挥重要作用。文章旨在通过生物信息学技术从不同禾本科作物中挖掘更多的ZmWRKY79同源基因，为玉米及其它禾本科作物提供抗逆境胁迫的候选基因。【方法】从NCBI数据库中获取玉米ZmWRKY79同源基因的基本信息，并对其进行染色体定位、基因结构可视化、功能结构域预测、进化关系分析、亚细胞定位预测、启动子顺式作用元件预测及非生物胁迫表达预测。【结果】在玉米、谷子、高粱、青稞、野生二粒小麦、普通小麦、水稻作物中共鉴定到9个ZmWRKY79同源基因，这些基因结构相似性较高，分布于不同的染色体上，且均属于第III类WRKY转录因子。系统进化分析结果显示ZmWRKY79蛋白同源序列可被分为I和II类，不同成员间进化受纯化选择，其中ZmWRKY79蛋白与高粱SbWRKY54蛋白同源性较高，达到81.58%。亚细胞定位预测显示所有ZmWRKY79同源蛋白均在细胞核，说明ZmWRKY79同源基因均在细胞核中发挥功能。启动子顺式作用元件预测显示ZmWRKY79同源基因的启动中主要包含组织特异性元件、应激响应元件和激素响应元件。非生物胁迫表达预测表明，ZmWRKY53和ZmWRKY74 2个ZmWRKY79的同源基因被确定为受逆境胁迫诱导。【结论】在7种禾本科作物中鉴定到9个ZmWRKY79同源基因，这些同源基因可能具有抗逆功能，为禾本科作物抗逆研究提供了更多的基因选择。
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月季茉莉酸羧基甲基转移酶基因RhJMT对花瓣衰老的调控
《园艺学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了解茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）在花瓣衰老中的作用机制，以月季‘Samantha’为材料，在花瓣中克隆了MeJA生物合成关键酶茉莉酸羧基甲基转移酶（jasmonic acid carboxyl methyltransferase,JMT）基因RhJMT。同源蛋白序列比对和系统进化树分析表明，RhJMT具有保守的Methylyransf＿7超家族结构域，属于SABATH蛋白家族。实时荧光定量PCR结果表明，RhJMT的表达量在花瓣进入衰老期后显著升高。通过病毒诱导的基因沉默（virus induced gene silencing,VIGS）技术对RhJMT进行功能验证，结果表明沉默RhJMT显著延缓花瓣衰老，外源施加MeJA能够抵消沉默RhJMT对花瓣衰老的延缓作用。以上结果说明RhJMT能够促进花瓣衰老，可能是通过控制MeJA的含量来发挥作用。
关键词： 月季 花瓣衰老 茉莉酸甲酯（MeJA） 茉莉酸甲基转移酶（JMT） VIGS
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不同密度、肥料和品种对红花主要农艺性状及品质的影响
《中国土壤与肥料 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为获得红花高产，采用L16（45）正交试验设计，研究不同密度、氮磷钾肥和品种对红花农艺性状、产量及品质的影响。结果表明：密度对茎粗影响不显著，对百粒重、含油量影响显著，对其余性状影响极显著；氮肥对株高、含油量影响不显著，对茎粗、果球着粒数影响显著，对其余性状影响极显著；磷肥对单株及小区花瓣产量影响不显著，对株高、茎粗及含油量影响显著，对其余性状影响极显著；钾肥对株高、果球着粒数及羟基红花黄色素A影响不显著，对其余性状影响极显著；品种对所有性状影响极显著。通过各因素不同水平的综合平衡分析比较，在云南红花主产区采用12.5万株/hm~2的种植密度（40 cm×20 cm）、375 kg/hm~2的施氮量、225 kg/hm~2的施磷量、240 kg/hm~2的施钾量以及选用品种云红三号的红花生产技术模式，可达到增产增效的最佳效果。
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香蕉枯萎病对抗感品种营养生长期光合特性的影响
《西南农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究香蕉枯萎病不同发病程度下对抗感香蕉品种光合特性的影响。【方法】以抗病品种云蕉1号（YJ）和感病品种巴西蕉（B）为供试材料，在2个品种不同发病程度下（健康植株0级和发病植株1、2、3级）,测定香蕉叶片的叶绿素相对含量（SPAD）、净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）、蒸腾速率（Tr）的变化。【结果】抗病品种YJ与B的光合日变化趋势相似，Pn日变化均呈“单峰型”曲线，没有“光合午休”现象，且峰值均出现在13:00—14:00时；通过光合-光响应曲线得到品种YJ的光补偿点与光饱和点分别为57.63和2630.00μmol/（m~2·s）,B的光补偿点与光饱和点为60.86和2250.00μmol/（m~2·s）;得到YJ与B的暗呼吸速率（Rd）为2.98和3.29μmol/（m~2·s）。B与YJ的Pn、Gs、Tr,与0级相比1、2、3级均呈现下降趋势，1级时B的Pn、Gs和Tr下降幅度均大于YJ,但在2、3级时B与YJ的Pn、Gs和Tr均大幅下降；与0级相比B与YJ的Ci在1、2级时均下降，而在3级时急剧上升，且与0、1、2级差异显著；与0级相比B与YJ的SPAD值在1、2、3级时显著低于0级，但在1、2、3级间差异不显著。【结论】在营养生长期未表现枯萎病症状的情况下，YJ能够更加广泛的利用光照，且暗呼吸速率（Rd）较低，有利于有机物质的积累，具有更佳的光合性能，更加适应云南独特的高原气候；在表现有枯萎病症状的情况下，轻度感病时YJ表现出一定的抗性，但随发病程度加剧，无论是易感枯萎病品种还是抗枯萎病品种，香蕉的光合作用均受到严重影响。
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人工饲料和桑叶对家蚕机体3种代谢酶活性的影响
《河南农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为明确人工饲料和桑叶饲育对蚕体代谢酶活性的影响，自五龄起蚕开始用人工饲料和桑叶分组饲养家蚕，采用分光光度法检测家蚕中肠组织和血淋巴中碱性磷酸酶（ALP）、羧酸酯酶（CarE）和乙酰胆碱酯酶（AchE）的活性变化。结果显示，人工饲料组家蚕的血淋巴ALP活性无显著变化，而桑叶组血淋巴ALP活性呈现逐渐增强的趋势；在60 h和72 h，桑叶组的ALP活性显著高于人工饲料组。桑叶组和人工饲料组血淋巴CarE活性均随时间的延长逐渐增强，其中人工饲料组CarE活性略高于桑叶组，但差异不显著。在12 h和24 h，桑叶组血淋巴AchE活性略低于人工饲料组；在36 h，桑叶组血淋巴AchE活性开始升高，并且在48、60、72 h持续高于人工饲料组，AchE活性分别是人工饲料组的1.52、1.64、1.71倍。桑叶组家蚕中肠ALP活性在36 h开始显著高于人工饲料组，并随着时间的推移持续升高，在72 h，酶活性极显著高于人工饲料组，酶活性为人工饲料组的2.13倍。人工饲料组中肠CarE活性在24 h开始显著高于桑叶组，在60 h达到最高值，为桑叶组的2.61倍；在72 h,CarE活性有下降的趋势，但仍显著高于桑叶组。桑叶组家蚕中肠AchE活性在12 h开始显著高于人工饲料组，在24～48 h桑叶组AchE活性继续增强；在60、72 h,AchE活性极显著高于人工饲料组，分别为人工饲料组的2.68、2.84倍。综合分析可知，喂食人工饲料家蚕血淋巴和中肠ALP和AchE活性均显著低于桑叶组，而中肠CarE活性显著高于桑叶组，提示人工饲料在一定程度上影响家蚕的代谢生理，降低蚕体抵抗不良环境的能力。
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重金属镉对药用大黄叶绿素含量及细胞超微结构的影响
《中药材 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：目的：研究重金属镉对药用大黄叶绿素、细胞超微结构的影响，以了解重金属镉对药用大黄的毒害作用。方法：采用Porra等叶绿体提取分析方法，分析200μmol/L镉（CdCl2）处理组和正常组的叶绿素含量差异；采用透射电镜观察，分析镉处理的药用大黄细胞超微结构的变化。结果：与对照组相比，200μmol/L镉处理组的叶绿素含量以及可溶性蛋白含量显著减低；而且镉对药用大黄根尖细胞及叶肉组织细胞有明显的毒害作用。结论：镉对药用大黄生理生化指标有不良的影响。本研究为药用大黄在镉污染条件下合理种植提供理论依据，也为研究药用大黄重金属镉超标问题提供基础研究。
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小粒咖啡铁皮卡叶绿体基因组密码子偏好性分析
《西北林学院学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了解铁皮卡叶绿体基因组密码子的使用特征及其成因，以筛选的52条蛋白编码序列为研究对象，利用CodonW和CUSP在线软件对其密码子使用特征进行系统分析。结果表明，基因组各位置的GC含量GC1、GC2、GC3分别为47.47%、39.52%、27.92%,30个高频密码子中，以U结尾占比53.33%,以A结尾占比43.33%,以G结尾占比3.33%,说明铁皮卡叶绿体基因偏好使用NNA和NNU型密码子，尤其偏好使用NNU型密码子。有效密码子数（ENC）、密码子适应指数（CAI）、最优密码子频率（Fop）分别为46.85、0.167、0.352,均揭示该基因组的密码子偏性较弱。中性绘图、ENC-plot、PR2-plot以及对应分析揭示密码子的偏好性受到选择及其他因素共同作用，最终确定了AUU、GUU和UCU等20个最优密码子。表明铁皮卡叶绿体基因组密码子的偏性较弱，偏好AU结尾的密码子。密码子的使用偏好性受到突变及选择等多种作用共同影响。
关键词： 小粒咖啡 铁皮卡 叶绿体基因组 密码子偏好性 最优密码子
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VIGS技术初步鉴定RgMLO6和RlMLO7基因对白粉病的负调控功能
《云南大学学报(自然科学) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨蔷薇科植物MLO基因在抗白粉病中的作用,研究应用病毒诱导的基因沉默技术(virus induced gene silencing,VIGS)抑制了大花香水月季RgMLO6基因和长尖叶蔷薇RlMLO7基因的表达,随后接种白粉菌对这2个基因进行抗性鉴定.研究发现在VIGS载体转化植株叶片20 d后,RgMLO6和RlMLO7基因的相对表达量显著下降了80%~90%,沉默效果明显.分别对2个基因沉默后的嫩叶进行白粉病抗性鉴定,大花香水月季和长尖叶蔷薇的抗性水平较对照组均提高.显微镜观察白粉菌接种2个基因沉默后植株叶片中菌丝体的生长情况,整体表现出沉默植株叶表皮细胞上的白粉菌生长较对照组生长缓慢.结果表明RgMLO6与RlMLO7基因对蔷薇科植物的白粉病有负向调控作用.
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