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利用酵母同源重组系统快速构建potyvirus病毒侵染性克隆方法

文献类型: 会议论文

第一作者: ZHAO Guangyuan

作者: ZHAO Guangyuan 1 ; 赵光远 2 ; Tuo Decai 3 ; 庹德财 4 ;

作者机构: 1.Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Science,Haikou ,Hainan 571101,China

2.College of Environment and Plant Protection,Hainan University,Haikou,Hainan 570228,China

3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所,中国海南海口571101

4.海

关键词: 番木瓜环斑病毒;马铃薯Y病毒属;酵母同源重组系统;侵染性克隆

会议名称: 第七届生命科学联合学术大会

主办单位: 海南省科学技术协会

页码: 245-252

摘要: 前一个时期,虽然分子生物学技术有了相当大的进步,但在构建基因全长较大的RNA病毒时,例如马铃薯Y病毒属全长侵染性cDNA克隆或者是RNA体外转录物时,会遇到很大的困难,其cDNA转入大肠杆菌(E.coli)感受态细胞时,可能会产生对宿主菌有毒性的物质,从而导致非特异性重组.这些问题可以利用插入内含子等方法来解决,但这些方法大多耗时费力且成功率低.本文将以番木瓜环斑病毒(Papaya RingSpot Virus,PRSV)为对象,介绍在不插入内含子的情况下利用酵母同源重组系统在两周之内构建完成其侵染性克隆的方法.

分类号: S436.67

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