文献类型： 中文期刊
作者： 贾新平 1 ; 叶晓青 2 ; 梁丽建 2 ; 邓衍明 2 ; 佘建明 2 ; 孙晓波 2 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院农业生物技术研究所
2.江苏省农业科学院农业生物技术研究所,江苏省农业生物学重点实验室
关键词： 狼尾蕨;DNA提取;SSR;反应体系
期刊名称： 江苏农业学报
ISSN： 1000-4440
年卷期： 2013 年 29 卷 06 期
页码： 1456-1462
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了研究蕨类植物基因组DNA的提取方法及建立适合狼尾蕨的SSR-PCR反应体系,以狼尾蕨为试验材料,利用改良的CTAB方法提取狼尾蕨叶片基因组DNA,分析SSR-PCR反应体系的主要成分(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq DNA聚合酶)对扩增结果的影响,并对引物的适宜退火温度进行优化。结果表明:引物DB-23的最佳退火温度为54℃;20μl PCR反应体系中,DNA模板浓度为30 ng/μl,引物浓度为1.5μmol/L,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.20 mmol/L,Taq DNA聚合酶加入量为1.5 U。利用建成的SSRPCR反应体系对8个蕨类品种进行扩增,扩增谱带清晰且有较高的多态性,说明该体系稳定可靠。
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