文献类型： 中文期刊

作者： 王晓丽 ¹ ; 钱晶 ¹ ; 马孙婷 ¹ ; 王晶宇 ¹ ; 夏兴霞 ¹ ; 诸玉梅 ¹ ; 郑素雅 ¹ ; 王永山 ¹ ; 欧阳伟 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室;江苏大学食品与生物工程学院;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

关键词： 传染性法氏囊病病毒;抗体;间接ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 159-167

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法,本研究首先将VP2基因分3段(部分序列重叠),分别为VP2(1～600)、VP2(376～975)和VP2(751～1350),并根据大肠杆菌对密码子的偏爱性进行优化,将优化的3个VP2基因片段分别克隆于原核表达载体pET28a(+)中,转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western-blot,结果 3个重组VP2蛋白均获得了表达。用纯化的3个重组VP2蛋白rVP2(1～600)、rVP2(376～975)和rVP2(751～1350)分别作为包被抗原,建立了IBDV抗体间接ELISA(rVP2-ELISA)。用rVP2-ELISA、IDEXX-ELISA(IBDV)及中和试验对96份临床血清样本进行检测,结果显示,3个重组VP2蛋白建立的IBDV抗体间接ELISA检测方法、IDEXX-ELISA(IBDV)与中和试验比较,相对敏感性分别为97.1%、61.8%、58.8%和100%;相对特异性分别为85.5%、82.3%、83.9%和25.8%;符合率分别为89.6%、75.0%、75.0%和52.08%。本研究为研制IBDV抗体间接ELISA检测试剂盒(以重组VP2蛋白作为包被抗原)奠定了基础。