文献类型： 中文期刊
作者： 罗晓雯 1 ; 曾令兵 1 ; 江南 1 ; 艾桃山 2 ; 范玉顶 1 ; 李波 2 ; 谢德兵 2 ; 孟彦 1 ; 周勇 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院长江水产研究所
2.武汉市农业科学院
关键词： 鳜;脑组织;细胞系;生物学特性;病毒敏感性
期刊名称： 渔业科学进展
ISSN： 2095-9869
年卷期： 2022 年 43 卷 005 期
页码： 179-188
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 鱼类细胞是开展鱼类病毒分离鉴定、功能基因分析以及生物制品制备等研究的重要物质基础.鳜(Siniperca chuatsi)是深受养殖者和消费者欢迎的养殖品种.随着鳜鱼养殖产量的逐年增加,其病害问题尤其是病毒病问题也日趋严重,但是,可用于鳜鱼病毒分离和基因功能分析的鳜细胞系缺乏.本研究采用组织块消化法,对来源鳜脑组织的细胞进行原代培养,建立了鳜脑组织细胞系,命名为MFB.MFB细胞在28℃含10%胎牛血清的L-15中已稳定传代超过70次,第25代鳜脑组织细胞的染色体众数为56.采用免疫荧光细胞化学技术(β-tubulin和Neu-N)鉴定MFB细胞的神经元纯度,结果显示,培养的MFB细胞为神经元类细胞.病毒敏感性实验结果显示,鳜蛙虹彩病毒(MFRaIV)、大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBRaIV)和大鲵虹彩病毒(GSIV)均可在MFB细胞中产生典型细胞病变效应,病毒滴度分别为108.68±0.12、108.36±0.15、1010.15 1.85 TCID50/mL.使用脂质体Lipofectamine?2000将pEGFP-N1转入MFB细胞,转染效率可达20%.本研究建立的鳜脑组织细胞系不仅对多种蛙虹彩病毒敏感,而且转染质粒效率较高,为鳜病毒性病原的分离及基因功能研究奠定了前期基础.
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