文献类型: 中文期刊
作者: 陈飞 1 ; 李莉 1 ; 孟宪志 1 ; 梁国栋 2 ; 刘艳玲 1 ; 吴红艳 1 ;
作者机构: 1.辽宁省微生物科学研究院
2.中国预防医学科学院病毒研究所
关键词: 双胸蚓属;蚯蚓纤溶酶;基因克隆;重组表达
期刊名称: 中国药学杂志
ISSN: 1001-2494
年卷期: 2003 年 38 卷 12 期
页码:
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的 克隆和表达我国特有的双胸蚓属蚯蚓 (Lumbricusbimastus)体内一种具有纤溶活性的蛋白质。方法 通过蛋白质N 末端测序、引物设计及合成、RT PCR得其对应的cDNA ,随后构建了 pBV2 2 0 P3 0 重组质粒 ,在大肠杆菌DH5α中进行非融合性表达 ,再经亲和色谱柱纯化复性 ,得到重组蚯蚓溶栓酶蛋白。结果 克隆cDNA全长 888bp ,编码含 2 4 2个氨基酸的成熟肽 ,SDS PAGE电泳显示分子量在 30× 10 3 左右 ,因此将其命名为P3 0 ,经活性测定 ,具有纤溶活性。结论 P3 0 为首次发现的新基因 ,在国际基因库的输入号为GenebankAF 10 96 4 8,并获得国家专利 ,专利号为 9810 2 2 5 7.X。
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