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猪伪狂犬病病毒变异毒株gE和gB蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 李艳华 1 ; 王寅彪 1 ; 李青梅 1 ; 解伟涛 1 ; 郭成留 1 ; 郭军庆 1 ; 邓瑞广 1 ; 张改平 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;河南百奥生物工程有限公司;新乡医学院公共卫生学院;河南农业大学牧医工程学院

关键词: 猪伪狂犬病病毒;gE蛋白;gB蛋白;单克隆抗体;鉴别诊断

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2019 年 12 期

页码: 2282-2287

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗免疫抗体与病毒感染抗体鉴别诊断方法,分别以PRV变异毒株的gE或gB重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选所需单克隆抗体,获得6株抗PRV gE蛋白的单抗(3E6、7E1、7C5、10C3、15C1、14C1)和6株抗PRV gB蛋白的单抗(1C1、5D2、2F11、5G8、10C7、8H5)。IPMA检测结果显示,gE蛋白单抗能识别PRV变异毒株,但不识别疫苗株;而gB蛋白单抗可同时识别PRV变异毒株和疫苗株。gE单抗10C3和gB单抗10C7的ELISA效价和IPMA效价均分别达1∶5×10~(5.0)和1∶8×10~(3.0)以上。所筛选出的单抗均不与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、流行性乙型脑炎病毒(JEV)等其他常见病毒发生交叉反应。gE蛋白和gB蛋白的表达及单抗的制备为PRV感染抗体与疫苗免疫抗体鉴别诊断(DIVA)试纸的研发奠定基础。

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