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非洲猪瘟病毒亲核结构蛋白p10可溶性表达及多克隆抗体制备

文献类型: 中文期刊

作者: 陈蓉 1 ; 赵琳 1 ; 王婉 2 ; 谢星 1 ; 王菁菁 1 ; 郝飞 1 ; 白昀 1 ; 张磊 1 ; 袁厅 1 ; 熊琪琰 1 ; 邵国青 1 ; 赵东明 2 ; 冯志新 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程重点实验室

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室

关键词: 非洲猪瘟病毒;亲核结构蛋白p10;可溶性表达;多克隆抗体

期刊名称: 扬州大学学报(农业与生命科学版)

ISSN: 1671-4652

年卷期: 2021 年 006 期

页码: 42-47

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用大肠埃希菌表达非洲猪瘟病毒(ASFV)亲核结构蛋白p10, IPTG诱导可表达可溶性重组蛋白p10,分子量约为30 ku。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明,成功获得重组蛋白p10,且重组蛋白可与ASF阳性血清发生特异性反应。将纯化后的p10作为抗原免疫新西兰白兔,分离血清并分析其反应特异性。ELISA检测结果表明,使用重组蛋白p10包被时,所得兔抗血清的效价可达1∶204 800;使用ASFV病毒裂解物包被,所得兔抗血清的效价可达1∶400;表明制备的多克隆抗体能同时与原核表达和ASFV全病毒蛋白反应。IFA检测结果进一步印证多克隆抗体能与ASFV发生特异性反应,表明该抗体具有良好的反应活性和特异性。综上所述,重组p10蛋白和多克隆抗体可为后续建立针对ASFV抗原、抗体的检测方法提供重要的生物材料。

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