文献类型： 中文期刊

作者： 张子威 ¹ ; 王磊 ² ; 李开敏 ² ; 卢昇 ¹ ; 郑卫卫 ² ; 陈松林 ¹ ;

作者机构： 1.南京农业大学无锡渔业学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室

关键词： 牙鲆;rnd1;迟缓爱德华氏菌;抗病免疫;抑菌活性

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 52-63

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 迟缓爱德华氏菌病是海水鲆鲽鱼类的主要病害，发掘抗病分子标记辅助育种是十分有效的策略。本研究以牙鲆（Paralichthys olivaceus） rnd1基因（Pornd1）为对象，对该基因在牙鲆抗病免疫方面的作用进行系统分析。首先对Pornd1基因进行克隆鉴定和抗病相关单核苷酸多态性位点的定位，然后利用荧光定量PCR （qRT-PCR）对Pornd1基因的组织分布、细菌感染后表达情况以及在抗病和易感家系中的表达水平进行检测。结果显示，Pornd1 c DNA开放阅读框为699 bp，编码232个氨基酸。结合前期GWAS分析数据，本研究对Pornd1基因扩增和测序，确定Pornd1基因内含子2上存在一个抗迟缓爱德华氏菌病相关单核苷酸多态性位点，该位点在易感家系和抗病家系中分别是C/T，抗病家系（freqT=0.92）高于易感家系（freqT=0.20），具有显著性差异（P＜0.05）。Pornd1在心、肝和肾中的相对表达量较高；迟缓爱德华氏菌感染后肝、肾和脾中Pornd1的表达量在6 h降低后逐渐升高，在48 h达到最高。Pornd1在抗病家系肝脏中的表达量显著高于易感家系。在蛋白水平，利用大肠杆菌（Escherichia coli）表达系统表达PoRnd1重组蛋白，检测其抑菌活性，发现PoRnd1重组蛋白对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌、迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）和哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）均具有一定抑菌活性。本研究揭示了Pornd1在牙鲆免疫抗病方面的作用，为开展牙鲆抗病分子育种提供了一个有效标记，并为解析其抗病性状的遗传机制提供理论基础。