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青稞酸性磷酸酶基因HvnACP2克隆和亚细胞定位研究

西北农业学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了探索青稞酸性磷酸酶基因HvnACP2 的基因和蛋白结构特点,为青稞磷吸收利用机制研究提供基础.以青稞'肚里黄'叶片为材料,根据植物基因组数据库Gramene中的大麦HvACP2基因和启动子区域序列设计引物,通过PCR获得青稞HvnACP2 基因和启动子区域序列.采用生物信息学软件对HvnACP2基因启动子区域元件以及蛋白理化性质、跨膜结构、磷酸化位点、信号肽、二级、三级结构进行分析.结果表明:HvnACP2有2个外显子和1个内含子,启动子区域有与分生组织、光响应、厌氧、茉莉酸和脱落酸相关的顺式作用元件.HvnACP2蛋白由454个氨基酸组成,分子质量为51 285.15 u,总原子数为7 058,亲水系数为-0.4 51,理论等电点为6.17,不稳定指数34.54,脂溶性指数为67.05.具有12个磷酸化位点和信号肽,不具有跨膜结构.HvnACP2 中a螺旋、延长链、p 转角、无规则卷曲所占比例分别为18.72%,53.96%、23.57%、3.74%.HvnACP2 和其他物种的同源蛋白都有紫色酸性磷酸酶N末端结构域和金属酸性磷酸酶结构域,将H vn ACP2 与其他植物的氨基酸序列进行对比并构建进化树,发现青稞HvnACP2与小麦TaACP2亲缘关系最近.亚细胞定位结果显示HvnACP2定位在细胞膜上.

关键词: 青稞 酸性磷酸酶 HvnACP2基因 生物信息学分析

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47份箭筈豌豆品种(系)在青海作秋绿肥的能力评价

草业学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:箭筈豌豆是我国重要的肥饲兼用绿肥作物之一,麦田套复种箭筈豌豆是青海等西北地区重要的农牧结合措施.在青海农区,田间条件下分析了47份箭筈豌豆品种(系)分枝期和初花期地上部生物量、氮磷钾累积量及土壤速效养分含量变化.运用主成分分析和聚类分析对不同箭筈豌豆品种氮磷钾吸收能力进行综合评价,以期筛选出适宜青海地区作绿肥栽培的品种(系).结果表明,47份箭筈豌豆资源初花期鲜草产量及氮磷钾累积量分别为21.33~47.31 t·hm-2、100.34~212.51 kg·hm-2、10.31~25.25 kg·hm-2和63.89~140.41 kg·hm-2.匈牙利初花期鲜草产量、氮钾累积量均最高,比当地主栽品种西牧333分别提高了58.92%、44.78%和54.40%.7501磷累积量最高,比西牧333提高了27.78%.两个时期生物量及氮磷钾累积量10个指标的主成分分析显示排名前五的品种分别为匈牙利、草原79-1、清水河麻箭豌(麻色)、324和黑皮741箭豌,匈牙利综合得分最高(6.84),751箭豌得分最低(-3.87).聚类分析显示,氮磷钾素吸收能力均聚为强、中、弱3类.氮素方面,吸收能力强的有4份资源,占8.51%,包括初花期氮累积量最高的匈牙利;吸收能力居中的有33份资源,占70.21%;吸收能力弱的有10份资源,占21.28%.磷素方面,吸收能力强的有7份资源,占14.89%,包括初花期磷素累积量最高的7501;吸收能力居中的有28份资源,占59.58%;吸收能力弱的有12份资源,占25.53%.钾素方面,吸收能力强的有8份资源,占17.02%,包括初花期钾累积量最高的匈牙利;吸收能力居中的有37份资源,占78.72%;吸收能力弱的有2份资源,占4.26%.47份箭筈豌豆资源的氮磷钾吸收能力表现出明显的差异,氮磷钾吸收强的分别有4、7和8份,这些资源平均吸氮量、吸磷量和吸钾量分别达到200.62 kg·hm-2、23.10 kg·hm-2和115.23 kg·hm-2.种植箭筈豌豆可显著降低分枝期和初花期土壤无机氮、有效磷和速效钾含量,能够充分利用休闲期土壤养分.综合来看,主成分分析显示排名前五的品种中匈牙利、草原79-1、清水河麻箭豌(麻色)和324表现较强的氮、钾吸收能力,草原79-1和匈牙利表现出较强的磷、钾吸收能力,可作为青海省有潜力的箭筈豌豆品种(系)在生产中验证.

关键词: 箭筈豌豆;养分吸收能力;主成分分析;聚类分析

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通过表型和基因型鉴定筛选适合春油菜区的优异种质

中国油料作物学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为了更好地利用甘蓝型油菜资源,以引进的124份和青海省20份甘蓝型油菜资源为材料,利用50K SNP芯片分析了这些资源的遗传多样性,并在春油菜环境下鉴定了开花期、茎秆强度、产量和品质等13个相关性状。结果表明:资源两两之间的遗传距离平均为0.4683,遗传距离大于等于0.5的资源对数占总对数的36.45%,表明这批资源的遗传多样性丰富。所有资源按地理来源划分为6个类群,西北春油菜资源群内遗传差异相对较小,但与国内其它4个类群间存在较大的遗传差异,平均遗传距离均超过了0.4。聚类分析表明,地理来源难以再作为遗传差异的有效判断依据。鉴定出具有茎直径超过17 mm、主茎木质部厚度超过1 mm、茎折断力超过80 N、茎秆强度超过40 N/cm2、千粒重超过6 g、含油量超过48%等单一优良性状的资源若干份,可用于春油菜种质创新和品种改良。筛选出22份综合性状优良的资源,构成两个杂交优势群,一个为西北和国外资源群,另一个为长江流域资源群,两个群之间具有较大的遗传差异。

关键词: 甘蓝型油菜 遗传多样性 基因型 表现型

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樱桃叶斑病菌生物学特性及室内药剂筛选

福建农业学报 2022 CSCD

摘要:【目的】明确青海省樱桃叶斑病菌杨柳炭疽菌Colletotrichum salicis的生物学特性,并筛选出高效的杀菌剂。【方法】采用十字交叉法及孢子计数法研究了病原菌的生物学特性,并用生长速率法测定病原菌对26种杀菌剂的敏感性。【结果】该病原菌的最适培养基为PDA;菌落生长和产孢的最适碳源分别为肌醇和葡萄糖,菌落生长和产孢的最适氮源分别为牛肉膏和蛋白胨。该菌在5~40℃条件下均能生长,且最适温度为25℃,致死条件为58℃水浴处理10 min;在pH值为4~12内均可生长和产孢,最适pH值为7;在12 h/12 h光暗交替下,菌落生长快且产孢多。供试杀菌剂中化学与生物杀菌剂抑菌效果最好的分别是10%苯醚甲环唑WG和0.3%丁子香酚SL,其EC50值分别为0.6、1.15 mg·L-1;20%乙蒜素EC、80%代森锰锌WP和500 g·L-1异菌脲SC的抑菌效果较差,EC50值高达301.44、679.36、1 012.52 mg·L-1。【结论】明确了樱桃叶斑病病原菌生长和产孢的最适培养条件和营养物质,并筛选出抑菌效果较好的杀菌剂。

关键词: 樱桃叶斑病 杨柳炭疽菌 生物学特性 高效药剂 毒力测定

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青藏高原4类典型水化学特征湖泊的细菌多样性差异及影响因素

生物多样性 2022 北大核心 CSCD

摘要:青藏高原分布着我国最密集的极端环境湖泊群,湖泊类型和水化学特征多样,而不同类型湖泊的细菌群落组成与多样性差异的系统研究相对较少.本文以青藏高原4类典型水化学特征湖泊(即氯化物型、MgSO4亚型、Na2SO4亚型、碳酸盐型)为研究对象,借助Illumina测序16SrRNA基因(V3-V4区)分析细菌多样性、群落组成差异及其优势属与环境因素的制约关系.结果表明:MgSO4亚型与氯化物型湖泊多属于超盐环境,而大多数Na2SO4亚型与碳酸盐型湖泊属于咸水、微咸水或淡水环境.4类湖泊获得分类地位明确的细菌共计45门81纲1,148属(52,031个OTUs),细菌Shannon指数为碳酸盐型(5.27±0.57)>Na2SO4亚型(4.96±0.51)>氯化物型(4.12±0.80)>MgSO4亚型(3.64±1.04).优势细菌门是变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门.变形菌门的相对多度总体较高,优势纲是γ-、α-和β-变形菌纲;厚壁菌门多分布于MgSO4亚型和氯化物型湖泊,优势纲是芽孢杆菌纲;拟杆菌门主要分布于碳酸盐型和Na2SO4亚型湖泊,优势纲是黄杆菌纲.全部氯化物型和少数MgSO4亚型湖泊的细菌组成相似,优势属是假单胞菌属(Pseudomonas)、乳球菌属(Lactacoccus)和不动杆菌属(Acinetobacter),其聚集分布与总盐度、主要离子(Mg2+、Cl-、Na+与K+)和温度相关;MgSO4亚型湖泊独有的常见属是芽孢杆菌属(Bacillus)、气单胞菌属(Aeromonas)、大洋芽孢杆菌属(Oceanobacillus)等,其聚集分布与SO42-浓度正相关;Na2SO4亚型与碳酸盐型湖泊的细菌组成相似,优势属是水弯曲菌属(Aquiflexum)、海仙菌属(Haliea)与苍黄杆菌属(Luteolibacter),其聚集分布与HCO3-浓度、pH值和海拔高度呈显著正相关.与世界上其他湖泊组/群相比,青藏高原湖泊具有独特的细菌优势属和常见属,不同类型湖泊的细菌群落组成存在显著差异,可能与水化学类型或地理位置有关.

关键词: 青藏高原 高原湖泊 细菌 生物多样性 水化学特征

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干旱胁迫下大蒜叶绿素合成基因家族鉴定分析

植物资源与环境学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为探究干旱胁迫对大蒜(Allium sativum Linn.)叶绿素合成的影响,本研究基于大蒜转录组测序数据,筛选出响应干旱胁迫的大蒜叶绿素合成基因家族成员,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术验证其表达情况后,采用生物信息学方法鉴定其序列属性。结果表明:从大蒜转录组数据中搜索得到的17个叶绿素合成基因家族中,筛选出6个积极响应干旱胁迫的大蒜叶绿素合成基因家族,即AsHEMA、AsHEMB、AsGSA、AsCHLD、AsCHLI和AsCAO。qRT-PCR和RNA-Seq结果显示:干旱胁迫6 d,AsHEMA、AsHEMB、AsGSA、AsCHLD、AsCHLI和AsCAO基因家族成员的表达量总体上显著增加。生物信息学分析结果显示:大蒜上述6个基因家族32个unigenes编码序列的氨基酸残基数为104~773,理论相对分子质量为11 978~84 411,理论等电点为pI 4.78至pI 9.86,不稳定指数为24.66~60.13,脂溶系数为80.04~104.59;除AsGSA家族外,其余5个家族成员的总平均亲水性为负值,即AsGSA家族成员为亲水蛋白,其余5个家族成员为疏水蛋白。保守基序分析结果表明:大蒜这6个叶绿素合成基因家族成员编码的氨基酸序列具有较高的保守性和相似性,其中,AsHEMA、AsGSA和AsCHLD家族高度保守;AsHEMB、AsCHLI和AsCAO家族保守性也较高,仅个别家族成员存在差异。进化树结果显示:大蒜同一叶绿素合成基因家族成员聚在一起,说明各基因家族的成员在进化上具有较高的保守性和相似性;AsHEMA、AsHEMB、AsCHLD、AsCHLI和AsCAO基因家族与单子叶植物小麦(Triticum aestivum Linn.)、石刁柏(Asparagus officinalis Linn.)和玉簪[Hosta plantaginea(Lam.) Aschers.]相关基因的同源性较高。上述研究结果显示:AsHEMA、AsHEMB、AsGSA、AsCHLD、AsCHLI和AsCAO基因家族的保守性和相似性较高,在大蒜响应干旱胁迫中发挥重要作用。

关键词: 大蒜 干旱胁迫 叶绿素合成基因 生物信息学分析

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大蒜果聚糖的水解方法及其定量分析

核农学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为了建立大蒜果聚糖含量的快速高效检测方法,本试验以乐都紫皮大蒜为试材,首先通过热水、超声、超声-热水法提取大蒜总糖,分别利用不同的水解试剂类型、pH值、浓度、水解时间将其中的果聚糖彻底水解,通过响应面分析筛选了果聚糖降解的最优条件;随后利用分光光度计和高效液相法测定水解前后果聚糖降解产物(蔗糖、葡萄糖、果糖)的含量并计算差值,得到大蒜组织中所有果聚糖的总含量;最后利用方法学验证对确立的方法进行了优化和评价.结果表明,热水法更有利于提取大蒜可溶性总糖;大蒜果聚糖最佳水解工艺条件为水解温度90℃、HCl浓度3 mol·L-1、水解时间1 h,经此条件水解后大蒜果聚糖含量预测值为627.903 mg·g-1 FW,与实际测定值(620.470 mg·g-1 FW)差异不显著,所得回归模型拟合良好.方法学验证结果显示,该果聚糖定量方法精密度、重复性及稳定性良好,三者的相对标准偏差(RSD)均小于1.5%;平均回收率为98.45%~101.04%,其RSD为0.59%~1.75%.利用此方法鉴定大蒜资源果聚糖性质发现,不同品种大蒜鳞茎中果聚糖含量差异显著.本研究筛选确立的检测方法准确性较高,结果可靠,适用于大蒜果聚糖含量的测定分析.本研究结果为大蒜资源果聚糖性状的深入评价和开发利用提供了理论依据.

关键词: 大蒜 果聚糖 强酸水解 高效液相色谱法(HPLC)

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150份青稞种质资源成株期耐旱性鉴定

西北农业学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为了解青藏高原地区青稞种质材料的耐旱性,有效利用青稞自身耐旱遗传潜力,为耐旱育种亲本选配提供参考,以150份青稞种质资源为研究材料,连续2 a检测在正常灌水和干旱胁迫2个水平处理下各青稞种质资源成熟期7个与产量相关的指标,利用耐旱性综合评价(D)、综合耐旱系数(CDC)和加权耐旱系数(WDC)相结合的方法进行耐早指标筛选及资源的耐旱性鉴定.结果 显示,利用主成分分析(PCA)可将7个与产量相关的指标简化为4个公因子,并携带原有7个指标88.26%的数据信息量,其中单株产量可作为比较直观的耐旱评价指标.综合这3种分析方法,筛选出24、12、15、14、109、7和111成株期耐旱性强的青稞种质资源.主穗穗数、单株粒质量、主穗长和单株粒数可以作为青稞成株期耐旱性简单且较为准确的评价指标.

关键词: 青稞;种质资源;成株期;耐旱性;综合评价

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青海共和盆地人工固沙植被恢复对土壤微生物数量的影响

干旱区资源与环境 2022 北大核心 CSCD CSSCI

摘要:为明确高寒沙区小叶锦鸡儿人工固沙植被恢复过程中土壤微生物数量特征,深入认识高寒沙区植被恢复和演替过程,文中对青海共和盆地青海省治沙实验站5个不同林龄小叶锦鸡儿人工固沙植被恢复区(8a, 19a, 31a, 44a, 57a)土壤理化性质和微生物数量进行了研究。结果表明:1)植被恢复区土壤微生物数量呈明显的季节变化:夏季>春季>秋季>冬季。2)小叶锦鸡儿灌丛下微生物数量高于灌丛间,在植被恢复44a后达到显著水平(P<0.05)。3)植被恢复区的土壤微生物数量均显著高于流动沙丘(P<0.05),且随植被恢复时间增加呈线性增长模式。4)植被恢复过程中,微生物群落是土壤颗粒组成和养分变化的敏感指标,其中,土壤沙粒含量、黏粉粒含量、有机质、全氮、速效氮等含量是促使微生物数量发生变化的主要环境因子。研究区域的治沙模式改善了土壤的颗粒组成和养分条件,促进了土壤微生物的积累,对沙区生态系统的恢复和可持续发展意义重大。

关键词: 高寒沙区 共和盆地 植被恢复 土壤微生物数量 土壤理化性质

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响应面法优化黄浆水絮凝工艺及其代谢组学分析

食品工业科技 2022 北大核心 CSCD

摘要:为了提高黄浆水的附加值和利用率,缓解排放黄浆水带来的环境污染,本文对黄浆水中的可溶性固形物进行絮凝处理.在单因素实验基础上结合响应面法对黄浆水中可溶性固形物的絮凝工艺进行优化,并且对絮凝前后黄浆水进行了蛋白质和总糖含量测定、生化需氧量和化学需氧量测定以及代谢组学测定.实验结果表明,絮凝沉降黄浆水可溶性固形物最佳工艺参数为:壳聚糖添加量为0.54 mg/mL,海藻酸钠添加量为0.24 mg/mL,pH为4.4,温度为47℃,此时黄浆水可溶性固形物沉降率为(46.26%±0.38%);蛋白质含量下降40.68%、总糖含量下降8.41%;生化需氧量和化学需氧量去除率分别为43%、40.95%.代谢组学实验结果表明:黄浆水絮凝前后有66种化合物含量存在显著变化.本研究结果表明絮凝能有效的降低黄浆水中可溶性固形物的含量,为黄浆水的进一步开发利用提供一定的参考.

关键词: 黄浆水;响应面分析;可溶性固形物;絮凝法;代谢组学

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